沿管壁緩慢加入戊二醛預固定液,不要沖擊細胞團,靜置30min后可送樣,請在4~10℃保存或運輸,嚴禁結冰(太靠近冰箱后壁或冰袋運輸都可能使樣品結冰,冬季寧可常溫送樣),細胞高速離心收集方法,本方法過去被大多數單位采用,沒有“GT2”時的應急取材也可使用,各儀器公司的拍攝控制軟件是比較專業化的處理工具,能夠在處理基本粒徑分析、晶面間距等測量外,還能夠進行傅里葉變換、降噪處理等,得到更加深入的數據結果。
鋨酸是強氧化劑,固定脂類、膜結構,有電子染色作用,3脫水,用適當的有機溶劑取代組織和細胞中的游離態水分,使之能與包埋劑混合,脫水要徹底,更換液體動作要迅速,脫水時間不宜過長,且固定后的樣品要充分漂洗,4滲透、包埋與聚合,4,1滲透,2包埋與聚合,加溫在60℃聚合形成固體基質,牢固地支撐整個細胞結構或組織,制成適于機械切割的固體樹脂包埋塊,利于切片,常用玻璃刀、鉆石刀進行超薄切片,刀上要裝水槽,并注入槽液。
染色方法有單染,包括鉛鹽單染和鈾鹽單染;雙染色,醋酸鈾染色和檸檬酸鉛染色,雙染色呈現結果更全面,我們一般采用的雙染法進行染色,常用染色劑:醋酸鈾,有微弱的放射性,主要染核酸、核蛋白、細胞核、結締組織,檸檬酸鉛,主要染膜結構、脂類、糖原等,易與CO2反應成沉淀,染色中應采取措施避免,電鏡照片主要解析粒徑分布、單晶/多晶、晶面結構、元素和原子分散,其本質是信號的空間分布,基本機理與比例尺地圖是一致的。